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关于裂解细胞以使细胞破碎施放出待测物质的操作

作者 大摇大摆
来源: 小木虫 250 5 举报帖子
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各位同仁,我想提取酵母菌细胞壁里面的麦角固醇,有个老师给我提的建议是清洗之后加少量无菌水,悬浮菌体,在培养箱里培养12h,这时菌死亡,释放出的溶菌酶能让细胞壁破碎,我想和各位讨论一下这可行吗?没做过对照 不清楚这种方法的效果

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  • 精华评论
  • snoopytbw

    这个方法效率太低了,直接用氯仿抽提好了,我以前用的是氯仿处理革兰氏阴性菌,处理时间不能太长,然后直接超高速离心去除菌体,上清再进行其他操作,有机抽提或者其他浓缩操作。

  • snoopytbw

    也可以用差速离心法,不过我试过效果还不如这个方法好,但是我的目标某膜蛋白,可能跟你这个略有区别吧,不妨一试

  • snoopytbw

    我用蛋白提取液重悬菌体,再加的少量氯仿,你可以用溶解醇的溶剂重悬,效果好不好,只能看实验结果

  • 大摇大摆

    引用回帖:
    4楼: Originally posted by snoopytbw at 2017-09-19 18:39:53
    我用蛋白提取液重悬菌体,再加的少量氯仿,你可以用溶解醇的溶剂重悬,效果好不好,只能看实验结果

    哇,谢谢你的建议,我们这一步是往样品处理之前加了一步,在这之后还要用KOH的甲醇溶液进行甲酯化。你的这个方法我很感兴趣,不知道能不能加你的QQ谈一下呢?我的Q:469789413

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